Sci Adv：基因编辑视网膜感光细胞治疗遗传疾病致盲疾病研究获进展

近日，里国文学艺术大学微生物学与医学系系主任薛天研究工作组、里国科学院神经科学研究工作小组研究工作员仇子龙是研究工作组合作，转化动态神经生命科学与创新DNA编辑技术，首次通过就是指拆分修整新方法（Homology directed repair， HDR）在活体视网膜非分裂反光细胞核里实现精密DNA修整，使视网膜色素有关系活体重获均动态功能。视网膜色素有关系是一种类似增生眼科病因，总括为患者视网膜内反光细胞核逐渐变异，出生于后伴随严重夜盲，动态范围内逐渐减小要到彻底失明，尚无必要疗程手段。CRISPR-Cas9DNA编辑是疗程增生病因的潜在手段之一，切割DNA组后一般会牵涉到两种DNA修整机制：非就是指末端连接（NHEJ）和就是指拆分修整。HDR可精密将错误DNA根据模板修整为正确序列，较强更为出色的疗程增生病因潜力。这样一来DNA编辑修整受遗传突变直接影响器官的成**核，可在定点趋于稳定肇因器官功能的同时又不触及生殖细胞核，是确保必要的DNA编辑疗程遗传DNA策略。但自然牵涉到的HDR依赖于细胞核有丝分裂，对于出生于后失去分裂并能的多种**核（例如反光细胞核）来说，HDR牵涉到生产成本太低，有鉴于此在体DNA修整。这成为阻碍CRISPR-Cas9DNA编辑技术用于成体**核疗程增生病因的关键点。为了解决上述问题，实现HDR对视网膜色素有关系等增生病因的精密疗程，该研究工作在CRISPR/Cas9细化，创新引入了MS2-RecA交叉蛋白系统。RecA为脱氧核糖核酸强调的可促进就是指拆分的反转录，研究工作人员通过改造赢得较强MS2转化的区的向导RNA，使MS2可与其转化。MS2-RecA交叉蛋白需在DNA切割手部临近招募更多模板DNA，并借此机会就是指拆分的牵涉到，从而提高在体就是指拆分修整的生产成本。这种利用Cas9/RecA的新型DNA编辑新方法被特指Targeted-RecA Enhanced homology-Directed repair，又称TRED。利用这一新方法，该研究工作成功实现了TRED矫正非分裂期反光细胞核的DNA突变，在DNA技术水平、cDNA技术水平和蛋白技术水平上，修整了视网膜内视杆细胞核的视网膜色素有关系突变，遏制均视杆和视锥细胞核的变异，修整视网膜色素有关系活体的均动态反光并能。该研究工作实现了出生于后非分裂细胞核的就是指拆分DNA矫正和涉及器官功能修整，指出的TRED新方法有望应用于多种人类遗传DNA的在体疗程。涉及成果以In vivo genome editing rescues photoreceptor degeneration via a Cas9/RecA-mediated homology-directed repair pathway为题，Skype发表于Science Advances。零碎出处：Yuan Cai，et al.In vivo genome editing rescues photoreceptor degeneration via a Cas9/RecA-mediated homology-directed repair pathway.Science Advances 17 Apr 2019：Vol. 5， no. 4， ea3335