J Clin Invest：说明了USP9X去泛素化ALDH1A3并维持GCSs的间充质特性

粘液病变（GBM）是最常见和破坏官能的人脑恶官能，其外观上在于广泛的内差异官能。尽管近来在多模式治疗方面夺得了的发展，但GBM病患者的结果仍然令人沮丧。GBM拥有一个细胞亚群，称为GBM肿瘤（GSCs），较强自我更另行活官能和多向分化潜能以及起始控制能力。因此，迫切需要探索针对GSC的另行治疗策略。并且，醛脱氢酶（ALDH）超家族包含19种酶，它们将内源和索科利夫卡醛人体内再加附加的羟基。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，参与人体细胞的各种生理过程。越来越多的证据指出，ALDH1A3在白血病肿瘤（CSCs）中都表现出高活官能，并直接影响这些细胞内的各种生物科学外观上。在GBM中都，已断定ALDH1A3作为持续间充质（MES）GSC的自我更另行和致瘤官能的最重要分子。然而，MES GSCs中都ALDH1A3失调的机制仍然是神秘的。2019年4月8日，南京医科大学第一教学医院王慧博团队等人在The Journal of Clinical Investigation上刊发题为“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的文章，断定USP9X是一种真正的DUB，可调节ALDH1A3多色氨酸化和稳定化。并且，USP9X是预测ALDH1A3hi MES GSCs富集的最重要分子，是MES GSCs自我更另行和致瘤官能所必需的。同时还评估了USP9X抑制对病患者来源的MES GSC猫狗超级任天堂模型的潜在治果。为了确认ALDH1A3蛋白质前提被色氨酸 - 蛋白质酶体系统设计（UPS）译成后控制，研究课题职员首先使用放线菌酮（CHX）阻断蛋白质质从头合再加并HEK293T细胞和要强菱形粘液细胞（NHAs）中都的ALDH1A3蛋白质质高度。实际上，ALDH1A3在CHX处理的8小时内日趋甲醛并几乎扫描至少。此外，用蛋白质酶体抑制剂MG-132处理细胞引发ALDH1A3蛋白质高度非同着增加。这些原始数据指出ALDH1A3通过UPS甲醛。接下来，研究课题职员帮助检验负责ALDH1A3稳定化的潜在DUB，并使用抗原HEK293T细胞中都的98DUB的siGENOMERTF单行本进行RNAi选取。该研究课题初始选取检验了与ALDH1A3表示相关的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293细胞中都的ALDH1A3共表示时，断定只有USP9X能够与内源官能ALDH1A3直接相互作用，从而暗示USP9X是控制ALDH1A3耐用官能的非同着候选物。为了测试这一点，将Flag标上的WT USP9X或催化剂失活的官能状体C1566A USP9X（在催化剂结构域的一个最重要酪氨酸中都装载点官能状）转染到HEK293T细胞中都。 WT USP9X而非C1566A官能状体的表示以剂量依赖官能手段增加ALDH1A3蛋白质高度，指出USP9X以依赖于其DUB活官能的手段调节ALDH1A3。粘液病变（GBM）肿瘤（GSC）的间充质（MES）变异代表癌细胞亚群，其因其总体波及官能和对基本上疗法的抗官能而闻名。近来已提出醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为持续GSC的MES外观上的最重要决定因素。然而，支持持续性ALDH1A3表示的机制仍然难以捉摸。在该研究课题中都，研究课题职员断定色氨酸特异官能蛋白质酶9X（USP9X）是MES GSC中都ALDH1A3的真正去色氨酸化酶。 USP9X与ALDH1A3相互作用，纤维蛋白并稳定化。此外，研究课题结果非同示FACS分选的USP9Xhi细胞富集较强高ALDH1A3活官能和有效致瘤控制能力的MES GSC。USP9X的消耗非同着上调ALDH1A3，引发MES GSC的自我更另行和致瘤控制能力的失去，这可以通过ALDH1A3的异位表示得到不大某种程度的扭转。此外，研究课题职员还表明USP9X抑制剂WP1130正向ALDH1A3甲醛并且在MES GSC衍生的原位猫狗超级任天堂模型中都非同示出非同着的治疗功效。另外，USP9X与原发官能人GBM仪器中都的ALDH1A3表示倾向相关，并且对于较强MES亚组的病患者较强预后价值。总的来说，研究课题结果说明了了USP9X作为ALDH1A3蛋白质稳定化的最重要去色氨酸化酶和GSC定向治疗的潜在靶点。原始出处：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019